细胞污染是3D细胞培养实验室以及更传统的2D单层培养的主要问题。如果生物污染物未被检测到，它们可能会严重影响您的结果数据，使其不准确或无用，或使任何由培养物生产的产品无法使用。
你是如何设计细胞培养协议的防止污染？污染虽然可以控制，但不能完全消除。那么，当污染不可避免地发生时，你会怎么做?
细胞污染的原因是什么?
细胞培养系统中污染的主要原因通常是化学或生物。在3D细胞培养中，污染可能发生在各种成分中，如生物墨水或细胞外基质．
化学污染
化学污染是指可能对细胞培养造成不良影响的非生命物质的存在。大多数化学污染物是在细胞培养基中发现的，来自试剂、制造试剂所用的水或补充试剂的添加剂。
化学污染物可能包括：介质、血清和/或水中的金属离子、杂质或内毒素；二氧化碳培养箱中使用的气体中的杂质；用于管子和瓶子的增塑剂；介质中各种组分光活化产生的自由基；用于清洁设备的消毒剂或化学品的残留物；或留在仪器、玻璃器皿或其他设备上的沉积物。
生物污染
生物污染物分为两类:一类是容易检测到的(如细菌、霉菌、酵母)，另一类是难以检测到的(如病毒、原生动物、支原体、其他细胞系、昆虫)。
细菌、霉菌和酵母是细胞培养环境中最常见的污染物。当抗生素不存在时，它们很容易被检测到，但当抗生素在细胞培养方案中常规使用时，它会导致难以检测的缓慢增长的感染。当这种污染物被发现时，它可能已经破坏了细胞培养。
实验室污染防治
生物污染物经常通过使用非无菌材料和培养基进入细胞培养。灭菌程序使用高压灭菌或干热灭菌必须正确遵循。
确保灭菌高压釜和烘箱的正确维护和操作。不要过度包装高压釜，这会导致加热不均匀，从而不能对高压釜的全部内容进行消毒。确保对你要消毒的材料和液体使用足够长的消毒周期——通常粘性液体或大量液体消毒不足，这可能导致污染。为保持无菌，应将用品和溶液妥善储存在无尘无虫的地方。
当然，使用良好的无菌技术也很重要。检查减少污染风险的10种方法在实验室里。通过洗手、戴手套和穿干净的实验室大褂，可以将空气中颗粒物的风险降至最低。减少抗生素的使用。每次只处理一个细胞系。确保定期监测污染情况。
什么是适当的污染后程序?
当你发现污染时，建议用高压灭菌来处理污染的培养物，并防止其扩散到其他培养物。有时，您可能需要尝试保存已被污染的有价值的文化。这通常只用于支原体感染，因为真菌和酵母污染物不太可能被根除，细菌污染物通常已经具有耐药性，许多培养物在清除后失去了关键特性。支原体污染最常用抗生素治疗，但没有一种方法能完全成功地根除。更重要的是，治疗通常不能完全消除感染，但将其推低到检测不到的水平。随着时间的推移，幸存下来的支原体可以恢复并发展成更严重的污染问题。
了解细胞培养污染的最佳做法，确保您的研究质量不会受到意外事件的影响，无论是大或小。然而，最重要的结论是什么呢?预防确实是最好的药物。
