作为病毒载体继续推动基因治疗创新更接近市场，许多研究人员都把目光放在优化转染过程也就是说，将正确的遗传物质送入细胞的过程。
这不仅是一个如何转染的问题，也是一个如何高效和高容量进行转染的问题。可能适用于一种细胞系的方法可能不适用于另一种细胞系，并且所有转染方案都可能对临床试验生产期间的可扩展性和成本产生不同的影响。
由于这些原因——以及其他原因——专家们通常会说，“这要看情况”，当他们被问及基于aav的项目进行转染的最佳方式时。作为康宁生命科学公司的高级生物工艺应用科学家，Ann Rossi Bilodeau经常会从研究人员那里得到关于他们应该采取哪种方法的问题:悬浮还是粘附?这个转染试剂还是那个?转染过程需要多长时间?
她说:“这在很大程度上取决于你最终想要达到的目标，没有一种方法是对的或错的。”“从细胞系到平台，再到设备，再到研究人员，有很多因素会影响转染，应该优化转染过程，以考虑到所有这些因素。”
尽管如此，仍有一些最佳实践值得探索，就像Bilodeau和转染试剂供应商的专家一样而Polyplus,解释。
当然，转染的主要问题是如何进行。基于aav的基因治疗研究一般依赖于chemical-mediated转染．与电穿孔和微量注射等更复杂或昂贵的工艺相比，化学转染易于使用，被认为是经济高效升级的金标准。
“大多数AAV疗法涉及HEK293细胞，这些细胞很容易用化学试剂转染，”polyplus -转染的科学支持专家Cassie-Marie Peigné说。“这些试剂，当专门为病毒载体生产而开发时，在可重复性和稳健性方面是很好的。这就不需要选择更昂贵的物理转染方法。”
平台本身也可以影响转染剂的选择，但这并不一定意味着在粘附系统和悬浮系统之间有明确的选择。在现实中，粘附平台和悬浮平台都与转染兼容，血管的选择更多地与细胞生长有关，而不是与细胞转染有关。
polyplus -转染公司的科学传播专家Alengo Nyamay'antu说:“对于贴壁细胞和悬浮细胞，优化转染需要相同的时间。”“重要的是你要优化。”
如果研究人员不确定选择哪个平台，Peigné建议他们在决定如何培养细胞时考虑时间轴和规模。
她说:“粘附平台是快速获得良好滴度的更传统的方法。”“由于这些流程在格林尼治标准时间设施中得到了很好的应用，它们已经得到了很好的建立。”
尽管如此，粘接容器可能仅限于向外扩展和扩大工艺，这可能在劳动力和制造足迹方面提出自己的挑战。然而，选择像康宁®CellSTACK®，HYPERStack®，而且CellCube®可以帮助以更少的人力提供更多的产量，特别是当配置为封闭系统时。另一方面，虽然含有悬浮转染试剂的悬浮槽可以更容易地扩大规模，但仍有相当多的时间来优化这些平台，以提高细胞活力和质量。
然而，请记住，规模是双向的，缩小规模可能和扩大规模一样重要。
Bilodeau说:“使用可扩展的血管和转染试剂非常重要，这样你就可以相对轻松地往返。”“这样，如果你需要回去优化，你可以在小规模的过程中进行故障排除，然后再进行生产。通常情况下，拥有一个具有良好特征的过程可能比最大化产量更重要。”
对病毒载体的转染似乎是一项艰巨的任务，但它并不一定是如此。为了有效地得出一个有意义的结果，研究人员需要知道成功是什么样子的，什么不是。例如，Peigné指出了她看到的一个常见错误:
她说:“人们倾向于认为转染效率与病毒滴度完全相关，但事实并非如此。”“如果你正在进行这种优化，如果这是你的目标，你应该始终从病毒滴度的角度来看结果。”
研究人员也应该放心地提出要求支持．像polyplus -转染和康宁生命科学这样的供应商可以帮助科学家根据他们独特的目标选择正确的产品。
Peigné说:“如果你要开始一个新工艺，联系制造商总是好的，以确保你在平台、介质、试剂和其他因素方面采用了最佳组合。”“他们可以帮助确保你事先按照正确的指导方针操作。知道去哪里找可以节省大量时间。”
